【摘 要】
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本文旨在研究Bax基因的过表达对HCC-9204细胞系凋亡的影响,以及是否能够调节HCC-9204细胞系对阿霉素的敏感性.采用一种可诱导性表达系统,MT-Ⅱ调节系统,在外加锌离子(ZnSO4)的条件下诱导Bax基因过表达.使用脂质体转染法,将Bax基因转入HCC-9204细胞中.免疫组化和WesternBlot分析显示ZnSo4诱导后在转染Bax基因的HCC-9204/Bax细胞中Bax基因的表达
【机 构】
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第二军医大学东方肝胆外科医院胆道二科,上海市,200000 第四军医大学,陕西省西安,710033
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本文旨在研究Bax基因的过表达对HCC-9204细胞系凋亡的影响,以及是否能够调节HCC-9204细胞系对阿霉素的敏感性.采用一种可诱导性表达系统,MT-Ⅱ调节系统,在外加锌离子(ZnSO4)的条件下诱导Bax基因过表达.使用脂质体转染法,将Bax基因转入HCC-9204细胞中.免疫组化和WesternBlot分析显示ZnSo4诱导后在转染Bax基因的HCC-9204/Bax细胞中Bax基因的表达显著增加,阳性信号主要位于HCC-9204细胞的胞浆和胞核周围,并且Bax基因过表达的部分细胞出现染色体和胞浆浓缩.TUNEL染色进一步发现转染Bax基因的HCC-9204/Bax细胞的凋亡指数明显增加(p＜0.05),流式细胞仪分析显示在ZnSo4诱导后48h出现显著的"亚二倍体峰".MTT试验显示Bax基因的过表达能够降低阿霉素处理后的细胞活力,呈时间依赖性.结果表明Bax基因的过表达不仅可以诱导HCC-9204细胞的凋亡,而且能够增加HCC-9204细胞对阿霉素杀伤作用的敏感性.
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