【摘 要】
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<正> 用戊巴比妥钠腹腔麻醉,取Wistar鼠双侧胫骨,修剪成片状。向广口瓶中加入Tris-Hcl缓冲液,加入蛋白抑制剂(Caprotinin、leupeptin、pepstatinA)然后放入骨片,恒温振荡。换
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<正> 用戊巴比妥钠腹腔麻醉,取Wistar鼠双侧胫骨,修剪成片状。向广口瓶中加入Tris-Hcl缓冲液,加入蛋白抑制剂(Caprotinin、leupeptin、pepstatinA)然后放入骨片,恒温振荡。换液用含Triton X-100的Tris-Hcl缓冲液,同时加入蛋白酶抑制剂,恒温震荡后蒸馏水连续冲洗。加入DNAse、RNAse混合液室温下消化,恒温振荡。蒸馏水充分冲洗后,骨片放入含Tris-Hcl液中4℃保存备用。脱细胞骨片用Von Ebnel氏脱钙液脱钙15天。经上述处理的骨组织切片与对照组相比发现,光镜和扫描电镜下均见到实验组细胞脱得很干净,显示出明显的骨陷窝及其周围毗邻结构。
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