【摘 要】
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目的:大血藤是临床上治疗肠痈腹痛的要药,我们将建立分离纯化其主要活性成分3,4-二羟基苯乙醇苷的方法,并对其生物学活性进行探究。方法:首先通过吸附和解吸附实验筛选出最佳
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目的:大血藤是临床上治疗肠痈腹痛的要药,我们将建立分离纯化其主要活性成分3,4-二羟基苯乙醇苷的方法,并对其生物学活性进行探究。方法:首先通过吸附和解吸附实验筛选出最佳的大孔树脂,利用C18硅胶柱进行纯化,并利用高效液相色谱进行纯度测定。同时,制作DSS诱导结肠炎模型,观察记录3,4-二羟基苯乙醇苷对疾病活动指数和结肠长度的影响,并应用试剂盒检测结肠组织中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和丙二醛(MDA)变化。在细胞水平,利用DCFA染色检测ROS的产生、Real-RCR检测炎症因子的表达和western-blot检测炎症相关蛋白的变化。结果:经过HPD300大孔树脂的分离和C18硅胶柱的纯化,获得了高纯度的3,4-二羟基苯乙醇苷。同时3,4-二羟基苯乙醇苷可以显着抑制结肠缩短和提高疾病活动指数,升高结肠组织中的SOD和GPx活性,降低MPO活性和MDA积累。另外,3,4-二羟基苯乙醇苷体外抑制LPS诱导的RAW264.7细胞ROS和炎症因子的产生,并抑制ERK和NF-κB炎症信号通路的活化。结论:HPD300大孔树脂结合C18硅胶柱可以用来大批量分离纯化3,4-二羟基苯乙醇苷,3,4-二羟基苯乙醇苷具有抗炎和抗氧化活性,可以保护DSS诱导的结肠炎。
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