草鱼干扰素调节因子1(IRF-1)的分子克隆及表达

来源 :第七届湘、鄂、赣、粤、桂五省动物学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dyjianing88
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  干扰素调节因子(IRF)家族在抗病毒感染的先天性免疫中发挥着重要的作用.在本文,我们从草鱼中克隆出了干扰素调节因子-1(命名为CiIRF-1)(GU997098).CiIRF-1共3129个碱基,包括10个外显子和、9个内含子和一个编码289氨基酸的开放阅读框.在开放阅读框推测编码的多肽链的N-端包含一个典型的IRF区域.RT-PCR表明在所测的各组织中IRF-I的本底表达量都较低,但是在Poly I:C刺激以后大多数组织中IRF-1的表达量均上调,尤其在脾、鳃和肠中上调明显.重组多肽CiIRF-1和CiIFN启动子片段的体外结合实验通过凝胶迁移率变动分析(gel mobility shift assays)技术进行分析.结果表明在体外CilRF-1可以和CiIFN启动子片段特异结合.pGL3-CiIFN启动子瞬时及pGL3-CiIFN和pcDNA3.1-CiIRF-1共同转染小鼠骨髓瘤细胞(MMCL)SP2/0,然后用荧光分光光度计检测荧光信号.这些结论表明CiIRF-1在草鱼抗病毒过程中可能起着重要的作用.
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