【摘 要】
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目的：探究砷暴露对THP-1巨噬细胞氧化应激和ABCA1基因表达的影响以及诱导细胞凋亡的可能机制.方法：分别以0μM、4μM、8μM、12μM次砷酸钠暴露THP-1巨噬细胞48h,NADPH氧化酶(NOX)抑制剂二联苯碘(DPI)和抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理细胞1h,CCK-8检测细胞生存率,流式细胞术DCFH-DA染色法检测细胞内活性氧的生成量,免疫荧光检测细胞内p47phox在细
【出 处】
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中国环境诱变剂学会第七届全国会员代表大会暨第十七次学术大会
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目的：探究砷暴露对THP-1巨噬细胞氧化应激和ABCA1基因表达的影响以及诱导细胞凋亡的可能机制.
方法：分别以0μM、4μM、8μM、12μM次砷酸钠暴露THP-1巨噬细胞48h,NADPH氧化酶(NOX)抑制剂二联苯碘(DPI)和抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理细胞1h,CCK-8检测细胞生存率,流式细胞术DCFH-DA染色法检测细胞内活性氧的生成量,免疫荧光检测细胞内p47phox在细胞内的定位,hoechest染色、流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况.RT-PCR和Western blotting分别检测细胞内ABCA1基因和蛋白的表达,砷暴露同时加入50μg/mLox-LDL培养48h,油红染色检测细胞内脂质富集.
结果：随着砷暴露浓度升高,p47phox转移至胞膜细胞数量显著增多,ROS生成量显著上升,RT-PCR和Western blotting结果显示砷暴露可以通过氧化应激的途径显著降低ABCA1的基因和蛋白的表达,同时增强细胞内脂质富集,细胞凋亡显著上升.加入DPI和NAC后NOX装配显著下降,ROS产生显著下降,凋亡也显著下降.
结论：砷暴露能够促进THP-1巨噬细胞内NOX装配,诱导氧化应激,同时抑制ABCA1基因和蛋白的表达,促进巨噬细胞脂质富集,最终诱导巨噬细胞的凋亡,加速动脉粥样硬化的形成.
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