shRNA沉默Aurora-B对骨肉瘤细胞U2-OS增殖和迁移的影响

来源 :江西省骨科高峰论坛暨骨科学分会第十六次年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:piglolo1987
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目的:探讨慢病毒介导shRNA抑制Aurora-B基因表达对入骨肉瘤细胞增殖、迁移的影响. 方法:靶向构建GV115-Aurora-B(AURKB)shRNA慢病毒载体LV-AURKB-1,LV-AURKB-2和阴性对照载体LV-AURKB-NC,测序鉴定;分别转染人骨肉瘤细胞系U2-OS(阳性干扰组:LV-AURKB-1组、LV-RKB-2组,LV-AURKB-NC转染组为阴性对照组,未转染细胞为空白对照组).RT-PCR检测Aurora-BmRNA的表达水平,Western blot测定Aurora-B的蛋白表达水平,MTT实验检测细胞的增殖情况,Transwell migration实验检测细胞迁移能力. 结果:转染后72h,与空白对照组和LV-AURKB-NC组比较,LV-AURKB-1、LV-AURKB-2组Aurora-B mRNA和蛋白的表达均明显降低,各阳性干扰组细胞的增殖,迁移能力均被明显抑制. 结论:慢病毒介导的shRNA可有效地抑制骨肉瘤细胞中Aurora-B的表达,显著抑制细胞增殖和迁移能力,提示Aurora-B可能在骨肉瘤细胞增殖,迁移中发挥着重要作用.
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