【摘 要】
：
禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)是人兽共患细菌病的潜在病原.PhoP/Q是最早被发现对APEC致病性及逃逸宿主防御反应起重要作用的二元调控系统.为了进一步揭示PhoP/Q二元调控系统与(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)致病力之间的关系.本实验研究了PhoP/Q基因缺失对APEC生物学特性及
【出 处】
：
2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微
论文部分内容阅读
禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)是人兽共患细菌病的潜在病原.PhoP/Q是最早被发现对APEC致病性及逃逸宿主防御反应起重要作用的二元调控系统.为了进一步揭示PhoP/Q二元调控系统与(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)致病力之间的关系.本实验研究了PhoP/Q基因缺失对APEC生物学特性及毒力的影响,并应用基因芯片筛选PhoP/Q可能调控的毒力基因,同时采用RNA-Seq技术筛选出APEC与PhoP/Q基因缺失株感染雏鸡小肠后的应答基因.生物学特性及毒力结果表明,缺失PhoP/Q基因无菌毛表达,肝脾组织载菌量减少,过氧化氢敏感性与鸡血清的补体杀菌实验中无明显差异.基因芯片结果显示,与原始株相比,PhoP/Q基因敲除株差异基因共292个,其中170个上调,122个下调,GO(Gene Ontology)分类结果显示,这些基因主要参与包括生物调节、新陈代谢过程、受体活动等.RNA-Seq结果显示,原始株攻毒组与对照组相比筛选出的差异表达基因共有131个差异基因,其中上调的差异基因有74个,下调的差异基因有57个.GO分类结果显示,这些基因主要涉及到蛋白结合、免疫反应、转运活动等功能.KEGG分析这些差异表达基因参与新陈代谢、Jak-STAT、RIG-I-样受体等信号通路.缺失株攻毒组与对照组相比筛选出的差异表达基因共有172个,其中上调的差异基因有93个,下调的差异基因有79个.GO分类结果显示,这些基因主要涉及到氧化还原活动、转运活动、免疫反应等功能.KEGG分析这些差异表达基因参与MAPK信号通路、PPAR、吞噬体、新陈代谢通路等.以上结果表明二元调控系统PhoP/Q在APEC毒力作用中扮演重要角色.基因芯片分析PhoP/Q基因缺失后筛选出crcA、ompT、rstA、rstB和iliA等二元调控系统PhoP/Q可能直接调控的毒力基因.应用RNA-Seq技术筛选APEC与PhoP/Q缺失株感染雏鸡肠道后的差异表达的基因,筛选出S100A9、LEAP2、CALB1、SOCS3、MT4等可能抵抗APEC毒力的免疫应答基因,为进一步研究APEC的的致病作用及宿主抗病机制提供一些实验依据.
其他文献
由结核分枝杆菌引起的结核病是一种慢性传染性疾病，是单病原菌引起的世界上死亡人数最多、造成危害性最大的传染性疾病，研制和开发预防结核病的新型疫苗对于有效控制结核病具有重要的公共卫生意义.本研究通过同源重组技术，将结核分枝杆菌重要保护性原FbpB和ESAT-6定点整合到减毒李斯特菌菌株LM△actA/plcB的基因组中，获得分泌表达融合蛋白FbpB-ESAT-6的重组菌LM∷ fbpB-esat-6.
细菌生物被膜是病原微生物产生耐药性、免疫逃逸和造成持续感染的重要因素之一，为弄清楚抗菌肽HJH-1对猪胸膜肺炎放线杆菌生物被膜的影响，采用聚苯乙烯微量测定法结合扫描电子显微镜技术，评价HJH-1对APP生物被膜的作用，结果表明，抗菌肽HJH-1在100ug/mL时可以显著抑制APP的生长(p＜0.05)，并可以显著降低APP生物被膜的形成，且在48h内均可显著降低APP生物被膜的形成，扫描电子显微
猪传染性胸膜肺炎是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumonia,APP)引起的一种高度传染性、致死性呼吸道疾病,给世界养猪业造成了巨大的经济损失.由于该病原菌血清型众多,各血清型间交叉保护性不强,且常伴随其它病原菌混合感染,给该病的治疗带来了巨大挑战.近年来,针对预防该病的研究主要集中在亚单位疫苗上,主要体现在对该病原菌外毒素、外膜蛋白、脂多糖、菌毛等亚结构的
大肠杆菌的多重耐药性已经严重威胁到抗生素资源及公共卫生安全。噬菌体裂解酶制剂被普遍认为是解决细菌多重耐药性的有效制剂。已经有应用于革兰氏阳性菌引发疾病的裂解酶制剂,却没有针对革兰氏阴性菌的裂解酶制剂。这是因为革兰氏阴性菌的外膜阻碍裂解酶与周质空间的肽聚糖相互作用而不能发挥裂解酶的杀菌作用。本研究将ColicinA的转运片段和识别片段与大肠杆菌噬菌体裂解酶融合在一起构建了一个融合蛋白(Colicin
噬菌体裂解酶是当前应对耐药性细菌的最有潜力的抗生素替代物之一,但是由于革兰氏阴性菌细胞壁存在外膜结构,使得革兰氏阴性菌的噬菌体裂解酶不能直接接触肽聚糖层从而严重制约了裂解酶的研究和应用.改造革兰氏阴性菌噬菌体裂解酶,使其具有直接从菌体外裂解细菌的能力,是研究新型抗生素替代品的重要策略.有文献报道针对一些本身裂解活性差或没有菌体外裂解活性的裂解酶,可对其结合结构域进行适当的改造,从而使得裂解酶能够由
本研究将菌群多样性测序与经典微生物学研究方法相结合,解析PCV2感染对仔猪空肠菌群的影响。将6头断奶仔猪随机分为感染组和对照组,每组3头。感染组通过口服和肌注感染PCV2,分别在感染后3、7、14、21d采血。在感染后21d宰杀仔猪,分别无菌采集空肠肠段及内容物,进行病理切片的制作、菌群测序和细菌培养鉴定。结果：病毒血症检测证明PCV2感染仔猪成功,感染后21d病毒血症达到较高水平；病理切片观察显
大肠埃希氏菌(又名大肠杆菌)常见于自然环境中,也是动物消化道的常住菌,属革兰氏阴性中等大小的杆菌.有些血清型的大肠杆菌具有致病性,有些不具有致病性,已有研究资料表明,大肠杆菌iss基因(increased serum resistance gene)的存在与否是判定大肠杆菌致病性的重要依据之一.因此,深入研究大肠杆菌iss基因与其致病力的关系对科学防治本病具有重要的指导意义.本研究分别采用套式PC
禽大肠杆菌病是由致病性大肠埃希氏菌(APEC)感染引起的多种临床病型总称,主要表现有胚胎和幼雏的死亡、败血症、气囊炎、心包炎、输卵管炎、肠炎、腹膜炎和大肠杆菌性肉芽肿等.由于致病性大肠埃希氏菌血清型众多,抗原结构复杂,给防治本病带来了困难.因此,探寻致病性大肠杆菌免疫保护谱广的抗原物质,进行肠道黏膜免疫,对特异性防治该病具有重要的实践意义.为获得理想的传递抗原物质的载体菌,本研究从健康鸡肠道中分离
为开发绿色环保抗菌制剂,作为饲料添加剂应用于生产实践,本研究以猪源抗菌肽PR39和PF1为研究对象,利用益生菌干酪乳杆菌构建了组成型融合表达PF1-PR39的重组乳酸菌系统rLpPG612-PPH-PF1-PR39,经Western blot和间接免疫荧光法鉴定,重组抗菌肽获得正确表达.采用动态生长曲线法和琼脂扩散法检测了重组肽抗大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌、李斯特氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和
通过了解山东省部分地区及河北沧州等地的规模化养禽场的大肠杆菌耐药情况,为合理选择抗生素提供参考.对山东、河北等地2013-2014年送检病禽进行细菌分离鉴定,对获得的大肠杆菌用17种药物进行敏感性试验.结果：分离出28株大肠杆菌,27株对17种药物存在不同程度的耐药性.对氨苄西林、氯霉素高度耐药,分别为96.43％和89.29％,对阿米卡星、多粘菌素、加替沙星耐药率较低,分别为32.14％、35.