【摘 要】
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用PCR方法从绵羊基因组DNA中扩增编码PrPc核心蛋白片段的DNA,克隆到硫氧还原蛋白融合表达载体pET-32a(+)上,构建小尾寒羊PrPc核心片段表达重组质粒命名为PrP-pET-32a(+).PrP-pET-32a(+)转化E.coliBL21,IPTG诱导融合表达小尾寒羊PrPc核心片段命名为Trx-PrP27-30.裂解细菌,溶解包涵体,利用载体上提供的Histag,使用Ni+离子亲和
【机 构】
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农业部动物检疫所,山东,青岛,266032;南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095 农业
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会
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用PCR方法从绵羊基因组DNA中扩增编码PrPc核心蛋白片段的DNA,克隆到硫氧还原蛋白融合表达载体pET-32a(+)上,构建小尾寒羊PrPc核心片段表达重组质粒命名为PrP-pET-32a(+).PrP-pET-32a(+)转化E.coliBL21,IPTG诱导融合表达小尾寒羊PrPc核心片段命名为Trx-PrP27-30.裂解细菌,溶解包涵体,利用载体上提供的Histag,使用Ni+离子亲和层析柱纯化蛋白,洗脱,然后透析、浓缩,得到分子量约35KD的Trx-PrP27-30.Westen-Blots鉴定,所得蛋白符合预期结果。
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