在线高效液相色谱-紫外光谱-质谱-分子活性筛选平台的建设及在中药研究中的应用

来源 :2016首届中国中药资源大会暨CSNR中药及天然药物资源研究专业委员会第十二届学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cslml1977
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  基于HPLC和活性筛选相结合的复杂体系中活性成分快速识别和鉴定的模式主要有两种:(1)生物活性筛选-HPLC分析,采用各种生物活性材料(例如酶、载体蛋白、细胞膜等)作为固定相的一种新兴色谱技术,中药提取物先与靶标分子(自由基、酶、蛋白、细胞等)反应,之后进行HPLC分析,由于不同成分作用程度的差别或与靶标具有不同的结合性能,而在固定相上表现出不同保留性能,可实现中药生物活性筛选和化学分离分析同步,通过比较反应前后样品的HPLC指纹图谱的变化可确定活性成分信息;(2) HPLC-生物活性筛选,中药提取物经色谱柱分离后,流出液经分流,其中一部分经过UV检测器以及MS或NMR系统,测定化合物的紫外光谱图,质谱碎片或NMR谱图,推测化合物可能的结构;一部分进行活性筛选,确定各个峰的活性,从而建立一种从复杂体系中高效筛选微量活性化合物的方法。这些联用技术的突出优点就是将色谱分离与活性检测相结合,形成在线系统,特别适合于复杂体系。并且该系统自动化程度高,实验结果重复性好,实验数据所提供信息量大(可同时提供成分的活性、结构信息),在短的时间内从含有多种复杂成分的天然产物样品中筛选出微量活性化合物。近年来该技术逐步成熟并已被广泛地应用于中药抗氧化活性成分研究、乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂、磷酸二酯酶(PDE)抑制剂、血管紧张素转移酶(ACE)抑制剂、细胞色素P450抑制剂研究、抗肿瘤活性成分、抗糖尿病活性成分研究、中药注射剂过敏原成分研究等。显示出良好的应用前景。本研究室在国家新药创制大平台的支持下,首次建立了在线高效液相色谱-紫外光谱-质谱-分子活性筛选平台,应用该平台建立了一系列中药在线研究系统,为中药活性成分研究提供了全新的研究系统和方法。应用在线高效液相色谱-紫外光谱-质谱-分子活性筛选平台已经建立20余个在线活性研究系统。其中包括抗氧化活性研究系统,胆碱酯酶抑制剂活性研究系统,-淀粉酶和-葡萄糖苷酶抑制剂活性研究系统,抗肿瘤活性研究系统(基于DNA结合活性研究系统),中药注射剂过敏原研究系统(基于蛋白结合活性研究系统)。
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