华支睾吸虫抗原特性鉴定及免疫学虫体定位

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华支睾吸虫病是由华支睾吸虫引起的危害严重的鱼源性人兽共患寄生虫病,主要引起人和多种动物的肝胆病状,严重者可引起胆管上皮癌,因此华支睾吸虫被国际癌症署(IARC)归为第Ⅰ类生物性致癌因子。传统的病原学诊断方法存在着一定的局限性和弊端,免疫学方法和分子生物学技术的不断发展为该病的诊断提供了新的途径。为了对华支睾吸虫重组抗原的特性鉴定及虫体定位,进而进行其生物学功能推测。本实验室通过对囊蚴与成虫的cDNA表达文库的免疫学筛选,获得若干个强反应原性抗原蛋白,在该基础上,发现2个含有20-30个大小氨基酸高度重复序列CsSQ1和CsSQ2,利用基因序列合成多肽,再将多肽与载体蛋白进行偶联,制备重组抗原rCsSQ1和rCsSQ2,免疫动物制备多克隆抗体,利用硫酸铵沉淀法及亲和层析法,进行抗体纯化,最后利用免疫荧光技术对抗原基因进行虫体免疫学定位。结果显示重组抗原rCsSQ1和rCsSQ2分别定位于华支睾吸虫的口吸盘和腹吸盘。免疫荧光技术成功地确定了华支睾吸虫两种抗原基因在虫体中的定位,推测可能与华支睾吸虫的免疫粘附作用有关,为华支睾吸虫抗原的免疫学特性及其在诊断中的应用研究提供依据。
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