利用IFN-γ释放试验检测弓形虫感染的初步研究

来源 :中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hellangel112
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本研究用IFN-γ释放试验及流式细胞术同时对Pru株弓形虫慢性感染及未感染的Balb/c小鼠进行检测,拟找出一种高灵敏度、高特异性的弓形虫检测方法.首先检测小鼠脑内包囊的存在情况以确定形成慢性感染,然后无菌取脾脏细胞在体外条件下进行抗原刺激,分为四个组:阴性对照组、人工合成多肽(弓形虫GRA4、GRA6、ROP7针对特异性CD8+T细胞的多肽)刺激组、弓形虫全虫抗原刺激组、PMA+离子霉素阳性对照组.适宜条件下孵育12-24小时后,取细胞上清,ELISA检测细胞培养上清中IFN-γ释放水平.同时,利用胞内细胞因子染色的方法对每个脾脏T细胞及其亚群的表面标志CD3、CD4、CD8及胞内分泌的IFN-γ进行特异性荧光标记,并进行流式分析.结果说明,利用IFN-γ释放试验及流式细胞术同时对阴性及慢性感染弓形虫的小鼠脾细胞及细胞上清进行检测,两者的结果之间具有很好的一致性,提示利用IFN-γ释放试验检测弓形虫感染具有较好的可靠性及应用前景.
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