【摘 要】
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目的:建立测定细薄星芒海绵Stelletta tenuis Lindgren总三萜活性提取物中Stellettin B和D含量的方法并研究总三萜提取物的高效液相指纹图谱,为科学评价及其有效控制其工艺和质量提供可靠方法.
方法:采用HPLC-DAD方法.色谱条件为YMC Pack-SIL分析柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为正己烷:乙酸乙酯,梯度洗脱(75％-3％),分析时间50min,
【机 构】
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第二军医大学长征医院药学部,上海,200003;上海交通大学生命科学技术学院,海洋生物技术实验室,上海,200240
【出 处】
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2006全国海洋生物技术与海洋药物学术会议暨全国第九届海洋药物学术研讨会
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目的:建立测定细薄星芒海绵Stelletta tenuis Lindgren总三萜活性提取物中Stellettin B和D含量的方法并研究总三萜提取物的高效液相指纹图谱,为科学评价及其有效控制其工艺和质量提供可靠方法.
方法:采用HPLC-DAD方法.色谱条件为YMC Pack-SIL分析柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为正己烷:乙酸乙酯,梯度洗脱(75％-3％),分析时间50min,0-30min正己烷:乙酸乙酯保持在75％:25％,30-35min正己烷:乙酸乙酯从75％:25％～3％:97％,35-50min正己烷:乙酸乙酯保持在3％:97％;流速1.0mL·min-1;检测波长:360nm;柱温:室温;进样量:20μL.结果线性回归方程为Stellettin B:Y=52181633x+957495(r=0.9969),线性范围为2.4μg～30μg;Stellettin D:Y=62636828 x-451022(r=0.9980),线性范围为2.0μg～32μg.精密度、稳定性和重现性试验的RSD在3.07％-4.76％之间.细薄星芒海绵总萜烯中Stellettin B和Stellettin D的平均含量分别为59.93％和30.98％.10批海绵总三萜提取物样品得到的指纹图谱有6个共有峰,分为两个部分:保留时间0-30min有4个峰,主要的特征峰1-3和7均在此区域内,通过与对照品的保留时间和紫外光谱以及质谱所得信息,确定色谱峰1-3和7分别为(1)Stellettin D;(2)Stellettin A;(3)Stellettin B;(7)Stellettin C,30-45min内有3个峰.通过峰面积和含量测定结果,确定最强峰为3号峰.相同色谱条件下测定了不同批次海绵总三萜提取物的HPLC图谱,其结果与总三萜有很好的相关性.
结论:该法为测定细薄星芒海绵总萜烯中有效成分提供了快速、准确、有效的方法.总三萜指纹图谱的特征性和专属性强,可结合含量测定全面控制细薄星芒海绵总三萜的质量,确保产品的均一性.
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