【摘 要】
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(目的)3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)广泛存在于原核和真核生物,参与能量代谢、DNA修复、调节RNA的核输出以及调节组蛋白基因表达等生命活动进程。作为糖酵解途径中的关键酶,3-
【机 构】
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四川农业大学动物医学院动物寄生虫病研究中心; 四川农业大学理学院;
【基金项目】
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成都大熊猫繁育研究基金会资助项目(CPF2014-17)
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(目的)3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)广泛存在于原核和真核生物,参与能量代谢、DNA修复、调节RNA的核输出以及调节组蛋白基因表达等生命活动进程。作为糖酵解途径中的关键酶,3-磷酸甘油醛脱氢酶在抗寄生虫方面具有广泛的应用价值,尤其在作为疫苗候选分子和药物靶标方面。本研究旨在探讨疥螨(Sarcoptes scabiei)GAPDH的应用价值。(方法)从疥螨总RNA中扩增钙调蛋白基因,构建原核表达载体进行诱导表达,并对表达的重组蛋白进行Western blotting分析和ELISA检测分析。(结果)本研究从疥螨总RNA中扩增出了3-磷酸甘油醛脱氢酶基因,其ORF框有990bp,共编码330个氨基酸。Western-blot显示原核表达的重组SsGAPDH能与人工感染疥螨的兔阳性血清发生特异性结合,以重组SsGAPDH为诊断抗原对45份阳性疥螨兔血清ELISA检出率为100%,SsGAPDH具有较强的免疫原性。(结论)本研究成功完成疥螨GAPDH基因的原核表达,为疥螨ELISA诊断方法的建立奠定了基础。
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