海参自溶过程细胞色素C的免疫组化研究

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本实验采用免疫组化方法对海参自溶过程中细胞色素C迁移的情况进行研究。免疫组化法能够准确定位组织中细胞色素C的分布,通过优化免疫染色条件,可以得到较好的海参体壁细胞色素C免疫染色切片。鲜活海参采用紫外线照射半小时引发自溶,自溶海参分为5组,室温分别放置0.5、1、2、4、6小时,分别取不同自溶时间的海参体壁组织块进行石蜡包埋,切片制作,免疫染色,之后进行显微镜观察。结果显示,鼠抗马细胞色素C抗体可以免疫识别海参体壁细胞色素C;最佳染色条件为:一抗稀释比例1:600,4℃孵育过夜,二抗稀释比例1:500,37℃孵育30 min;在光学显微镜下可以观察到被染成棕色的颗粒物质。本研究表明,通过比较不同自溶时间的海参体壁免疫染色切片图,发现随着自溶时间的增加,海参体壁中细胞色素C呈弥散趋势扩散分布于组织中,反映出细胞线粒体中的细胞色素C随自溶时间的延长不断释放到周围组织中。
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