【摘 要】
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目的：人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)在受到外界刺激时可以分化为成牙本质细胞,生成牙本质,保护牙髓组织.TET1 (ten-eleven translocation 1)是DNA去甲基化过
【机 构】
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中山大学附属口腔医院广东省口腔医学重点实验室
【出 处】
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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第五次全国牙体牙髓病学临床学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)在受到外界刺激时可以分化为成牙本质细胞,生成牙本质,保护牙髓组织.TET1 (ten-eleven translocation 1)是DNA去甲基化过程中的关键因子,可通过调节靶基因甲基化水平调控其转录水平,对细胞增殖与分化起重要作用,但其对hDPCs成牙本质分化的作用尚未知.本研究探讨TET1对hDPCs增殖及成牙本质分化能力的影响.方法：根据TET1基因序列设计3条寡核苷酸序列,将序列构建至慢病毒载体hU6-MCS-CMV-Puro上,293FT细胞中包装慢病毒,取病毒原液转染hDPCs,以非特异性序列转染细胞为对照组.荧光定量RCR及Western Blot检测TET1敲低后TET1的mRNA及蛋白表达水平；CCK8法检测细胞增殖能力；对TET1敲低组及对照组细胞进行矿化诱导,诱导第7天后分析ALP活性；诱导第14天,Western Blot检测DSPP和DMP1蛋白表达水平；诱导第21天,茜素红染色检测细胞矿化结节形成能力.结果：成功构建TET1敲低的hDPCs模型.CCK8结果显示,TET1敲低组hDPCs增殖能力低于对照组(P＜0.05)；与对照组相比,成牙本质分化诱导7天敲低组ALP活性降低(P＜0.05),诱导14天后敲低组DSPP和DMP1蛋白表达水平下降(P＜0.05),诱导21天后敲低组矿化结节形成减少(P＜0.05).结论：敲低TET1可抑制hDPCs增殖及成牙本质分化能力.
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