【摘 要】
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目的:建立高效液相色谱串联质谱和在线生物分析快速筛选和鉴定植物提取物中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物。方法:采用超声提取,LC-DAD-MS-BCD法筛选活性成分。ZorbaxSBC
【基金项目】
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澳门澳门大学基金(UL015/09-Y1)资助
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目的:建立高效液相色谱串联质谱和在线生物分析快速筛选和鉴定植物提取物中具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物。方法:采用超声提取,LC-DAD-MS-BCD法筛选活性成分。ZorbaxSBC18column(250mm×4.6mmi.d.,5μm)色谱柱;以0.1%甲酸–甲醇为流动相梯度洗脱;柱温37℃;流速为1.0mL·min-1;进样量40μL;紫外检测波长为270nm;生化检测(BCD)波长405nm;质谱各参数设置:电喷雾离子源,阳离子模式;干燥气(N2)流速7L·min-1,温度为350℃;喷雾气电压:35psi。对鉴定的活性成分采用体外活性测定方法进行验证。结果:从普洱茶中筛选到两个活性成分并通过紫外吸收和质谱裂解碎片特征鉴定为(-)-epigallocatechingallate(EGCG)和(-)-epicatechingallate(ECG),它们的IC50分别为175.2μmol·L-1和246.9μmol·L-1,低于阿卡波糖的IC50:3553.0μmol·L-1。抑制机制研究表明EGCG和ECG的抑制方式为非竞争抑制。结论:本方法快速、简单,可用于从复杂的天然产品中筛选活性成分。
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