【摘 要】
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目的:Bmal1基因是一种重要的生物钟基因。本课题拟通过构建慢病毒载体,利用RNA干扰技术,研究Bmal1基因在体内外对小鼠结肠癌细胞C26增殖、基因调控的等方面的影响,从而探讨Bm
【机 构】
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中山大学肿瘤防治中心实验研究部; 华南肿瘤生物学国家重点实验室、中山大学肿瘤防治中心实验研究部;
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目的:Bmal1基因是一种重要的生物钟基因。本课题拟通过构建慢病毒载体,利用RNA干扰技术,研究Bmal1基因在体内外对小鼠结肠癌细胞C26增殖、基因调控的等方面的影响,从而探讨Bmal1基因在肿瘤发展中的生物作用。方法:构建干扰Bmal1基因表达的慢病毒载体;运用MTT法测定C26细胞的生长曲线;应用rt-PCR法测定时钟基因以及肿瘤相关基因的表达情况;应用western blot法测定蛋白表达情况。结果:在小鼠结肠癌细胞C26中Bmal1的表达较小鼠正常细胞明显下降。沉默Bmal1的细胞生长速率较对照细胞明显加快,细胞培养96小时后,沉默Bmal1的细胞较对照组生长增加约20%。沉默Bmall基因后,时钟基因per2、per3的基因表达水平明显下调,rev-erbα等基因表达上调;细胞周期调控基因weel的基因表达明显下调;p21、p53等抑癌基因表达下调。结论:Bmal1基因可能作为一个抑癌基因影响着肿瘤的发生发展,并值得进一步深入探讨。
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