【摘 要】
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本实验室2012～2014 年对我国养殖和野生三疣梭子蟹的微孢子虫感染状况进行了广泛的流行病学调查，发现我国养殖和野生三疣梭子蟹感染的微孢子虫在分子水平(SSU rRNA)上属于同一个种(Ameson sp.).微孢子虫孢子具有坚硬的几丁质外壳，对分子检测的效率产生较大影响，为此，本研究根据调查获得的我国三疣梭子蟹微孢子虫流行种的分子序列设计了两对特异的套式引物(MI1F/MI545R 和MI23
【机 构】
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农业部东海与远洋渔业资源开发利用重点实验室,东海水产研究所,中国水产科学研究院,上海,200090
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本实验室2012～2014 年对我国养殖和野生三疣梭子蟹的微孢子虫感染状况进行了广泛的流行病学调查，发现我国养殖和野生三疣梭子蟹感染的微孢子虫在分子水平(SSU rRNA)上属于同一个种(Ameson sp.).微孢子虫孢子具有坚硬的几丁质外壳，对分子检测的效率产生较大影响，为此，本研究根据调查获得的我国三疣梭子蟹微孢子虫流行种的分子序列设计了两对特异的套式引物(MI1F/MI545R 和MI230F/MI426R)，通过PCR 扩增条件的优化以及特异性和灵敏性测试，建立了我国三疣梭子蟹微孢子虫流行种的套式PCR 检测技术.对2014 年舟山海域采集的76 份野生三疣梭子蟹样品的检测结果表明，该套式PCR 检测技术把微孢子虫感染的检出率从5.26％(仅基于引物MI1F/MI545R)提高到17.11％，而同期基于微孢子虫通用引物(V1F/1492R)的检出率为0.该套式检测技术不仅大幅提高了微孢子虫微量感染时的检出率，而且提高了检测的特异性，有效避免了通用引物检测时常常出现的非特异性扩增.
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