【摘 要】
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目的：观察氧糖剥夺/再灌注(OGD/OGD-R)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12自噬和凋亡的发生及进展.方法：PC12细胞经氧糖剥夺及再灌注处理建立OGD/OGD-R模型,在处理不同时间点,应用GuavaNexin法检测OGD组及OGD-R组细胞活性和凋亡率;WesternBlot法检测自噬相关蛋白LC3II、Beclin1及凋亡相关蛋白Bax、aCaspase3表达变化;免疫荧光法观察自噬小体;分
【机 构】
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成都,四川大学华西第二医院儿科 610041 ;成都,四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院早期发育与损伤实验室 610041
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目的：观察氧糖剥夺/再灌注(OGD/OGD-R)诱导大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12自噬和凋亡的发生及进展.方法：PC12细胞经氧糖剥夺及再灌注处理建立OGD/OGD-R模型,在处理不同时间点,应用GuavaNexin法检测OGD组及OGD-R组细胞活性和凋亡率;WesternBlot法检测自噬相关蛋白LC3II、Beclin1及凋亡相关蛋白Bax、aCaspase3表达变化;免疫荧光法观察自噬小体;分别使用自噬上下游抑制剂(3-甲基腺嘌呤、E64d+pepstatinA)进行调控,观察自噬的波动;透射电子显微镜法直接观察自噬相关超微结构改变.结果及结论：OGD/OGD-R均能激活PC12细胞自噬和凋亡,可为进一步探索脑缺氧/再灌注损伤病理生理过程中自噬与凋亡间潜在的串流奠定基础.
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