辣椒疫霉对新型杀菌剂双苯菌胺的抗性机制研究

来源 :第十一届中国植物病害化学防治学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yeka
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  双苯菌胺(SYP-14288)是沈阳化工研究院自主研发创制的新型杀菌剂,前期研究显示其对辣椒疫霉(Phytophthora capsici)生长发育各个阶段均具有良好抑制作用;同时该药剂能显著促进辣椒疫霉呼吸作用并使ATP的生成量明显降低,具有解偶联剂的典型特征.本研究采用室内药剂驯化的方法筛选获得21株辣椒疫霉对双苯菌胺的抗性突变体,抗性倍数介于3.30~151.94倍,经10代继代培养后,大多数突变体的抗性可稳定遗传.选取抗性水平大于70倍的高抗突变体RJ-2、RJ-4、RJ-6及其亲本JA8,抗性水平小于10倍的低抗突变体RN-4、RN-5及其亲本ND-1共同作为试验材料开展辣椒疫霉对双苯菌胺抗性机制研究.已有研究结果表明双苯菌胺主要影响疫霉菌体内ATP的合成,因此本研究重点关注辣椒疫霉抗性突变体及其亲本菌株在ATP合酶不同亚基基因上的点突变或过量表达情况.对ATP合酶相关亚基基因alpha、beta、delta、epsilon及OSCP进行ORF全长扩增和序列比对,未在抗性突变体中发现区别于亲本菌株的一致的点突变.进一步检测了上述ATP合酶相关基因的表达量,发现高抗突变体ATP合酶基因固有表达量高于亲本(3.24~19.20倍),加药处理后ATP合酶基因表达量无变化或仍有上调;而低抗突变体ATP合酶相关基因固有表达量与亲本无显著差异,但在药剂作用下大部分相关基因的表达量显著上调(最高达9.32倍).推测ATP合酶相同亚基相关基因在不同抗性水平的突变体中表达水平变化程度不同可能是导致抗性菌株抗性水平存在差异的原因.测定了辣椒疫霉抗性突变体与亲本菌株体内的本底ATP含量,结果表明,抗性突变体菌体内ATP含量相对亲本菌株更低,单位菌丝材料中ATP含量仅为亲本含量的约10%,推测辣椒疫霉对双苯菌胺的抗性与其对ATP的更低需求或更高效利用相关.综上,抗性突变体中本底ATP含量下降可能导致ATP合酶相关基因在空白处理或药剂处理情况下发生过量表达,从而试图弥补本底ATP的不足;辣椒疫霉对双苯菌胺的抗性机制可能主要与抗性突变体相对亲本菌株在正常生长时对ATP的需求降低和利用率提高相关.
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