【摘 要】
：
[目的]克氏鳌虾CyclophilinA (CyPA)基因序列和功能到目前为止都是未知的,在本研究中,该基因的特性被分析.[方法]经克隆、测序后拼接,获得了克氏原螯虾的CYPA基因的全长cDNA序列,GenBank登录号为GU126426.应用荧光实时定量PCR分析该基因在克氏鳌虾不同组织中的转录情况,以pET30a(+)为载体构建重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达,制备了多克隆抗体.利用Weste
【机 构】
：
湖州师范学院,浙江省淡水水产研究所
论文部分内容阅读
[目的]克氏鳌虾CyclophilinA (CyPA)基因序列和功能到目前为止都是未知的,在本研究中,该基因的特性被分析.[方法]经克隆、测序后拼接,获得了克氏原螯虾的CYPA基因的全长cDNA序列,GenBank登录号为GU126426.应用荧光实时定量PCR分析该基因在克氏鳌虾不同组织中的转录情况,以pET30a(+)为载体构建重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达,制备了多克隆抗体.利用Western blot检测克氏鳌虾不同组织中亲环素A的表达情况.[结果]PCR获得了CyPA编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为495 bp.荧光实时定量PCR分析表明,该基因在心脏中的转录水平最高.Western blot 试验显示该蛋白在除了卵巢以外的其他组织中均有分布.[结论]成功获得克氏鳌虾CyPA基因的全长cDNA、CypA纯化蛋白及CypA多克隆抗体,初步了解了其在克氏鳌虾各组织中的分布情况,为进一步研究CypA在克氏鳌虾中的免疫机制奠定了基础.
其他文献
为了综合评价溶解氧和有毒铜绿微囊藻及其交互作用对三角帆蚌耗氧率(oxygen consumption rate,OCR)、排氨率(ammonia excretion rate,AER)和O：N的影响,本文通过为期21d的室内3×3正交设计实验,测定了在不同溶解氧(dissolved oxygen,DO)水平和有毒铜绿微囊藻溶度(toxic Microcystis aeruginosa concen
细胞培养技术是指将细胞模拟体内生长环境，放置在无菌、一定营养条件、适宜的温度及酸碱度下，使其生长、繁殖，并维持其结构和功能的一种技术，也叫细胞克隆技术，是细胞生物学研究中的重要技术，在生物学领域中占有重要地位。哺乳动物细胞的培养起步较早，随着生物技术的不断发展鱼类细胞体外培养逐渐发展起来并且应用广泛。鱼类属于变温动物，所以培养鱼类细胞的条件变化范围较宽，不同种类的鱼最适条件不同。目前，鱼类细胞已经
基于CO Ⅰ序列,对中国沿海及泰国普吉岛8个地区171个里氏拟石磺个体的遗传结构进行分析,共检测出单倍型101个,117个多态性位点,里氏拟石磺具有高的单倍型多样性(0.974±0.005)和核苷酸多样性(0.03218±0.00132).分子方差分析(AMOVA)显示,50.99％的变异存在于种群间,49.01％的变异发生在种群内.群体间遗传分化固定指数(Fst)、基因流(Nm)及遗传距离分析表
卵形鲳鲹是中国南方的一种重要的海水鱼类,近年来由于人类的过度捕捞,卵形鲳鲹野生群体已经迅速的减少,为了了解遗传状况保护,我们从(GT)13富集文库里筛选和鉴定出了21个卵形鲳鲹多态性微卫星位点.等位基因的数目为从2到10,观测杂合性从0.083到0.792,期望杂合性从0.081到0.886.多态性信息含量(PIC)从0.0767到0.8623.有六个位点偏离哈迪-温伯格平衡.最终,这21个新的多
草鱼是我国养殖产量最高的养殖种，年产量达到460多万吨。草鱼性成熟周期在5-6年，如采用常规混合选育方法，常规育种周期漫长，目前草鱼没有经审定的良种。为了缩短草鱼的育种周期，需进一步探索新的草鱼育种的理论、技术和方法。本实验室自2008年来，先后构建了两个优质草鱼育种核心群体。
为了探明罗非鱼渗透压调节的分子机理,采用RT-PCR方法从橙色莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)、荷那龙罗非鱼(0.hornorum)及其正反交子代垂体组织中克隆了催乳素Ⅰ基因(PRLⅠ),并对其核苷酸序列和推导的氨基酸序列等进行了分析.研究结果表明,四种罗非鱼的PRLⅠ基因序列长度均为798bp,ORF区长639bp,共编码212个氨基酸,另含5端非编码区39bp,
为开发大鳞副泥鳅微卫星分子标记,通过Illumina高通量测序对大鳞副泥鳅进行转录组测序,获得105M reads,组装后得到71887条非冗余转录组序列,平均长度1464.58 bp.基因注释发现与Nr和Sting数据库有同源性的序列分别有38,733和17,434条；对所有序列进行GO (gene ontology) 和KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and
为获得大口黑鲈与生长相关的SNP标记,应用于大口黑鲈分子标记辅助选择育种.本研究根据大口黑鲈(Micropterus salmoides) EST-SNP库中HBP基因的序列(GenBank accession NO.： KF652241),用直接测序法在HBP基因3非编码区获得了3个SNPs位点：Hl(G+2782T),H2 (T+2817C)和H3 (G+2857A).随机选择同批繁殖、同塘养
为探究杂交鳢受精卵遭受突发低温胁迫环境后胚胎发育情况,以斑鳢为母本,乌鳢为父本,对10对亲鱼进行了人工催产,让其自然产卵受精。产卵后20-30min,分别取大约1000粒卵立即放入0,2,4℃的低温水中处理5min,然后转入正常的孵化池中进行孵化。在孵化过程中,用数码液晶显微镜观察胚胎发育过程中畸形胚胎的形态结构,结果显示0,2,4℃处理组分别出现3,5,12种畸形胚胎。分别为尾部侧弯,尾部螺旋,
为了研究生长抑制因子蛋白3在菲律宾蛤仔(Rudi tapes philippinarum)中的分子结构及该基因的组织表达.实验采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE)首次在菲律宾蛤仔中获得了生长抑制因子蛋白3 (ING3)基因cDNA全长序列.结果显示,该基因cDNA全长1442 bp(不包括polyA),含一个1248 bp的开放阅读框(ORF),编码415个氨基酸,ING3蛋白计