【摘 要】
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为观察重组表达的CP15抗原对小鼠隐孢子虫感染的免疫保护效果，将重组质粒pET-28a-CP15转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达，用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表达情况
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所 农业部动物寄生虫学重点开放实验室 中国农业科学院动物源性食品安全研究中心,上海 200241 宁夏大学农学院,宁夏 银川 750021
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十一次学术研讨会
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为观察重组表达的CP15抗原对小鼠隐孢子虫感染的免疫保护效果，将重组质粒pET-28a-CP15转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达，用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表达情况和反应原性。将纯化的重组表达蛋白与弗氏佐剂充分乳化后免疫BALB／c小鼠，观察疫苗诱导的体液、细胞免疫水平及对隐孢子虫感染的免疫保护效果。结果显示，成功表达了隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genotype)CP15基因，Westernblot分析表明制备的重组蛋白具有良好的免疫活性。免疫小鼠血清中特异性抗体IgG水平随免疫次数的增加而增加，在第3次免疫后达到最高，极显著高于对照组(P<0.01)；CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率、T淋巴细胞增殖反应、IL-18和IFN-γ分泌水平均极显著高于对照组(P<0.01)。感染后小鼠粪便卵囊的real time PCR检测结果显示，与对照组相比，免疫组小鼠卵囊排出量极显著低于对照组(P<0.01)，减卵率达到99.3％，排卵时间缩短为1d，表明制备的亚单位疫苗免疫后小鼠产生了较强的免疫保护效果。
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