【摘 要】
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目的：肝细胞癌是发病率排名第六位,致死率排名第三位的恶性肿瘤.无限制的肿瘤生长、转移和缺少有效的治疗手段导致肝细胞癌的高致死率.研究表明VM是一种在恶性肿瘤中,包括肝细胞癌存在的一种新型供血方式.最近报道ROCK参与调控HCC中VM形成,因此推断ROCK诱导的无限制肿瘤的生长是潜在的同时治疗内皮血管和VM形成的靶点.在此部分研究中,旨在寻找一种新的高效的以ROCK为靶点抑制VM形成的候选化合物,并
【机 构】
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临床药学科,上海市第一人民医院,上海交通大学医学院,上海,200080,中国
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目的：肝细胞癌是发病率排名第六位,致死率排名第三位的恶性肿瘤.无限制的肿瘤生长、转移和缺少有效的治疗手段导致肝细胞癌的高致死率.研究表明VM是一种在恶性肿瘤中,包括肝细胞癌存在的一种新型供血方式.最近报道ROCK参与调控HCC中VM形成,因此推断ROCK诱导的无限制肿瘤的生长是潜在的同时治疗内皮血管和VM形成的靶点.在此部分研究中,旨在寻找一种新的高效的以ROCK为靶点抑制VM形成的候选化合物,并探讨其作用机制.
方法：Incarvine C(IVC)从中国传统中药材中提取分离;western blot和应力纤维丝形成实验用于确定IVC对ROCK的影响;划痕和侵袭实验用于探讨IVC对细胞运动的影响;CCK-8和克隆实验用于探讨IVC对人肿瘤细胞系的抑制作用;流式细胞术用于分析IVC对细胞周期和凋亡的影响;real time-qPCR和western blot技术用于分析IVC对细胞增殖影响的机制研究;real time-qPCR、共聚焦和western blot技术用于分析IVC对VM形成的影响与机制研究.
结果：IVC是一种从中国传统中药材中提取分离的具有抗HCC的生物碱.本部分发现IVC能抑制ROCK底物的磷酸化和ROCK介导的肌动蛋白纤维丝的形成.同时,IVC抑制细胞的运动.进一步研究发现IVC浓度依赖性的抑制MHCC97H的增殖,通过降低CDK-2/cyclin-E1的表达和升高p21/p53的表达诱导细胞周期停滞在G1期和促进MHCC97H的凋亡.最后,IVC通过降低VE-cadherin,EphA2,PI3K,MMP14,MMP2,MMP9和LAMC2来抑制VM形成.
结论：综上所述,IVC可以通过抑制ROCK来调节MHCC97H细胞的增殖和VM形成,提示IVC是一种潜在治疗HCC的新药候选化合物.
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