【摘 要】
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目的:Oct4介导下小鼠原代肝细胞发生去分化的细胞形态及基因表达的变化趋势,应用小分子化合物将去分化的肝细胞诱导为胰腺干祖样细胞.方法:采用两步胶原酶灌流法体外分离小鼠原代肝细胞并进行培养,构建慢病毒表达质粒pWPT-Oct4,包装、浓缩表达Oct4的慢病毒,将其感染原代肝细胞,观察细胞的形态变化,用RT-PCR法监测nestin、ALB、AFP、Foxa2、SOX17,HNF6,HNF1β,SO
【机 构】
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解放军301医院内分泌科 解放军301医院基础所分子生物学实验室
【出 处】
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中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议
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目的:Oct4介导下小鼠原代肝细胞发生去分化的细胞形态及基因表达的变化趋势,应用小分子化合物将去分化的肝细胞诱导为胰腺干祖样细胞.方法:采用两步胶原酶灌流法体外分离小鼠原代肝细胞并进行培养,构建慢病毒表达质粒pWPT-Oct4,包装、浓缩表达Oct4的慢病毒,将其感染原代肝细胞,观察细胞的形态变化,用RT-PCR法监测nestin、ALB、AFP、Foxa2、SOX17,HNF6,HNF1β,SOX9的表达趋势,结合细胞形态的变化,用含联合应用小分子化合物:表皮生长因子(EGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),Exendin-4等对去分化后的肝细胞进行诱导,观察细胞形态,用RT-PCR及免疫荧光染色法检测胰腺干细胞标志物CK19、ABCG2的表达.
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