坛紫菜碳酸酐酶家族基因的克隆与表达分析

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碳酸酐酶(EC 4.2.1.1)是催化CO2可逆水合反应的一类含锌金属酶,在无机碳利用中扮演着重要的角色。坛紫菜(Pyropia haitanensis)是我国紫菜人工栽培的两个主要种类之一,对其碳酸酐酶家族基因的克隆至今未见报道。本研究采用RACE技术,以坛紫菜全转录组测序获得的Unigene序列为基础,扩增获得了6条坛紫菜碳酸酐酶基因的全长cDNAs,分别命名为PhCA1、PhCA2、PhCA3、PhCA4、PhCA5和PhCA6。基因序列全长分别为1156 bp,1151 bp,1146bp,849bp,1099bp和1013bp,分别编码275,287,206,245,304和290个氨基酸残基的碳酸酐酶;其中PhCA1、PhCA2具有3个锌结合的His残基所构成的催化活性中心,属于α碳酸酐酶家族;PhCA3、PhCA4、PhCA5属于β碳酸酐酶家族;PhCA6属于LbeatH超家族。基因表达的定量PCR分析结果表明这些碳酸酐酶基因在坛紫菜生活史不同世代中的表达水平存在显著差异。
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