丝裂霉素对肝癌细胞作用效果的代谢组学研究

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肝癌是严重威胁人类健康的恶性疾病之一。丝裂霉素(Mitomycin)作为一种常用的抗生素类化疗药,对肝癌有很好的治疗效果。为考察丝裂霉素的抗癌效果,在本实验中建立了基于液质联用技术的代谢组学分析方法,研究了丝裂霉素作用下,肝癌细胞HepG2胞内代谢物的变化。实验用的细胞分为两组,给药组加入用PBS溶解的丝裂霉素,终浓度为10nM,另一组加入等量的PBS作为对照。药物作用24h后,收集细胞并对其进行预处理,获得其胞内代谢物。利用UPLC/Q-TOFMS(BEHC18柱,ESI正离子模式)对这些代谢物进行分离和鉴定。采集到的原始数据用MarkerLynx进行峰读取、峰匹配和归一化;随后利用Simca-p软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)的多元统计处理,找出了差异显著的代谢物(p<0.05)。利用数据库检索、二级质谱以及标准对照品对这些代谢物进行了结构鉴定和确认,得到了有显著变化的生物标记物。
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