【摘 要】
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生长抑制特异性基因2(Gas2)编码的蛋白是微丝系统的组成成分,主要起着在凋亡过程中调节微丝和细胞形态变化作用.本研究中,我们从罗非鱼中克隆得到了Gas2基因长度为1233bp
【机 构】
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中国水产科学研究院长江水产研究所,湖北省武汉市东湖新技术开发区武大园一路8号,430223
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生长抑制特异性基因2(Gas2)编码的蛋白是微丝系统的组成成分,主要起着在凋亡过程中调节微丝和细胞形态变化作用.本研究中,我们从罗非鱼中克隆得到了Gas2基因长度为1233bp的全长cDNA序列,包含140bp的5UTR区,,编码340个氨基酸的1023bp的ORF区,70bp的3UTR区.获得了长度为3600bp的启动子区序列.并对该启动子进行了转录因子结合位点分析,发现其启动活性可能集中在-2800bp.另外,我们对罗非鱼进行了低温胁迫实验,首先在30℃水温下养殖2周,随后以1℃/d的降温速率将实验温度从30℃降至10℃.利用实时定量荧光PCR检测该基因在罗非鱼受低温胁迫时,其在肝脏,小肠,肌肉,脑中表达随温度降低而显著增加.此外,对该基因还进行了原核表达,并获得了特异性抗体.利用该抗体对肝脏,小肠,肌肉,脑中该基因蛋白表达情况进行了Western Blot分析,发现其蛋白水平表达也随温度降低而显著增加.以上结果显示Gas2基因可能参与了细胞的凋亡过程,并为认识罗非鱼在受低温胁迫时分子变化机制提供更多数据.
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