【摘 要】
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[目的]识别参与1,4-苯醌诱导细胞凋亡的miRNA分子,探讨miRNA在其中的调控作用.[方法]不同浓度1,4-BQ(1、10、20、40μM)处理U937细胞24后,MTT检测细胞毒性,流式细胞术检
【机 构】
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首都医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系,北京100069
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]识别参与1,4-苯醌诱导细胞凋亡的miRNA分子,探讨miRNA在其中的调控作用.[方法]不同浓度1,4-BQ(1、10、20、40μM)处理U937细胞24后,MTT检测细胞毒性,流式细胞术检测细胞凋亡,染料法实时PCR检测miRNA34a和miRNA133a及其相应靶基因表达.分别构建down-miRNA34、up-miRNA133a基因的重组慢病毒载体,转染U937细胞,同时转染含空载体的病毒液作为阴性对照,然后加入1,4-BQ作用24 h后收集细胞,提取细胞RNA,检测miRNA34a、miRNA133a以及Bcl-2,PRDM16 mRNA的表达情况.[结果]随着1,4-BQ的浓度的增加,U937细胞的相对存活率呈现下降的趋势,细胞的总凋亡率呈现上升趋势.1,4-BQ可增加miRNA34a水平,伴miRNA133a表达降低.慢病毒down-miRNA34a表达后1,4-BQ诱导的靶基因bcl-2表达上调,细胞的相对存活率明显高于干扰之前；而慢病毒up-miRNA133a表达后,1,4-BQ诱导的靶基因PRDM16表达下调.[结论]MiRNA-34a和MiRNA-133a分别通过各自的靶基因Bcl-2,PRDM16调控1,4-苯醌诱导的细胞凋亡.
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