【摘 要】
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差速离心法纯化H5亚型禽流感病毒,经0.1﹪甲醛灭活后,免疫8周龄Balb/c小鼠,取其脾脏与骨髓病细胞SP2/0融合,以杆状病毒表达的禽流感核蛋白、H5亚型禽流感病毒为包被抗原的间接E
【机 构】
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农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心(青岛)
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差速离心法纯化H5亚型禽流感病毒,经0.1﹪甲醛灭活后,免疫8周龄Balb/c小鼠,取其脾脏与骨髓病细胞SP2/0融合,以杆状病毒表达的禽流感核蛋白、H5亚型禽流感病毒为包被抗原的间接ELISA试验筛选出2株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株3C10、6F5,免疫印迹试验表明,两株单抗均可特异识别H5、H9亚型禽流感病毒约为60KD的核蛋白.两株单抗的间接免疫荧光试验显示:感染重组杆状病毒的Sf9细胞的胞浆及胞膜区呈特异性绿色荧光,而感染野生型杆状病毒的Sf9细胞未呈现任何特异性荧光.利用本中心生产的禽流感病毒浓缩抗原、重组核蛋白抗原与两株单抗的腹水进行琼扩试验,3C10、6F5腹水的琼扩效价分别为2<9>、2<8>,我们所研制的禽流感核蛋白单抗将用于禽流感的快速检测.
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