MALDI-TOF-MS鉴定具有ACE抑制活性的N型生姜糖蛋白结构

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本试验的目的是鉴定具有ACE抑制活性的生姜糖蛋白的糖链结构。研究采用高效液相色谱法测定生姜糖蛋白的ACE抑制活性,利用凝集素微阵列技术和磁性微粒技术筛选和富集生姜糖蛋白,在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱下鉴定富集后生姜糖蛋白的糖链类型及结构。结果表明5μmol/L的生姜糖蛋白的ACE抑制活性率为53%,说明生姜糖蛋白具有一定的ACE抑制作用。在凝集素微阵列技术下分析筛选出ConA作为富集生姜糖蛋白最佳的凝集素,在ConA-磁性微粒纯化下的获得的生姜糖蛋白,在PNGase F酶作用下释放其糖链,应用MALDI-TOF-MS质谱检测,由质谱图分析,纯化后的糖蛋白显示有10条N-糖链,其中包含高甘露糖型,岩藻糖型以及混合型。本研究有望对未来研究生姜糖蛋白活性与糖链结构关系提供参考。
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