库尔勒香梨(Pyrus sinkiangensis Yu)简称香梨,属蔷薇科梨属中的新疆梨系统,原产新疆库尔勒地区,为古老的地方品种,栽培历史在1 400年以上.SPL是一类植物所特有的转录因子,参与植物的生长发育以及在植物成花过程中具有调控作用.以库尔勒香梨花器官为材料,2016年4月在新疆巴音郭楞蒙古自治州哈拉玉宫乡巴格吉格代村库尔勒香梨园,选择3株作为试验树,于盛花期(香梨树上大约70％左右开花)采集全花(花梗以上部分),去掉花瓣,并将其从萼片和花托交接处分割成两部分,把这两部分分别用锡箔纸包好,迅速投入液氮中保存,回实验室后置于-70 ℃下保存备用.根据库尔勒香梨SPL基因的全长cDNA序列以及梨基因组信息设计引物,利用PCR技术克隆获得库尔勒香梨SPL基因的全长cDNA序列及其上游调控序列.获得kfpSPL的基因组DNA全长为3 320 bp,与该基因的cDNA序列比较发现包含3段内含子,第1段内含子位于基因组DNA的第407～949 nt处,第2段内含子位于第962～2 386 nt处,第3段内含子位于第2 530～2 673 nt处.获得kfpSPL上游启动子参考序列,根据参考序列设计引物,从库尔勒香梨基因组DNA中克隆得到上游启动子序列,经测序表明启动子长为2 332 bp.将kfpSPL的上游启动子序列进行生物信息学分析,预测得到转录因子结合位点及其功能.分析结果表明,序列中存在多数启动子具有的基本转录元件TATA-box和CAAT-box,并分别位于多个位点上,从预测中还发现一些其他顺式调控元件.本研究中发现,kfpSPL基因启动子序列中存在与赤霉素、脱落酸、水杨酸等激素相关的顺式作用元件,不同生长调节剂的处理能调控kfpSPL在脱萼果和宿萼果花器官中的表达水平.但对于这些顺式作用元件如何调控kfpSPL的表达,具体的调控模式还有待进一步研究.