【摘 要】
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目的 采用血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导犬骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs),探讨BMSCs向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的潜能和内皮细胞的特征性鉴定方法 方法 无菌条件下行犬髂骨穿刺,采集骨髓15～20ml,全骨髓10％FBSDMEM培养液进行原代培养。将第二代纯化
【机 构】
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广州医学院第三附属医院骨科 中日友好医院关节外科
【出 处】
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中华医学会第10届全国显微外科学术会议
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目的 采用血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导犬骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs),探讨BMSCs向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的潜能和内皮细胞的特征性鉴定方法 方法 无菌条件下行犬髂骨穿刺,采集骨髓15～20ml,全骨髓10％FBSDMEM培养液进行原代培养。将第二代纯化的BMSCs细胞悬液接种于2个75em2培养瓶中,加入含VEGF、bFGF的DMEM/FI2培养液(细胞接种密度为1×106/ml)体外诱导培养。对细胞形态特征进行观察,对诱导分化的细胞行CD31、VWF、VEGFR-2荧光免疫蛋白检测。结果 原代培养的BMSCs形态呈长梭形或不规则形,呈均匀分布生长。诱导分化后的细胞光镜下单层融合生长,呈铺路石样形态；电镜下细胞呈多边形,可见特征性的Weibel-Palade小体；经成血管内皮细胞诱导培养7～14d后,BMSCs诱导分化细胞CD31、vWF和VEGFR-2的表达呈阳性。结论 犬BMSCs易于体外分离培养及扩增,经VEGF、bFGF体外定向诱导后的细胞具有血管内皮细胞的特征且细胞纯度高、细胞数量大。
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