目的建立一套普通PCR的ABO基因分型方法,并利用该方法筛选出常见的ABO基因型。方法收集血型正反定型一致的66份体检者的血液标本,利用普通PCR对ABO基因多态性位点261、467、802、803、1061基因型进行鉴定,测序验证其特异性。结果普通PCR筛选出8种常见ABO双倍体基因型,A101/ O01,02型7例,A102/ O01,02型8例,A101/A102型3例,B101/B101型3例,B101/ O01,02型14例,O01,02/ O01,02型18例,A101/B101型3例,A102/B101型10例,与表型鉴定结果相符。结论我们所建立的普通PCR基因分型方法是可靠的,可以作为下一步SYBR Green I实时荧光PCR方法的参照和评价标准。目的探讨SYBR Green I实时荧光PCR在血型鉴定中的应用。方法利用第一部分中我们所建立的普通PCR分型方法筛选出的ABO表型和基因型设计适用于SYBR Green I实时荧光PCR的错配引物,通过融解曲线筛选出最佳引物后对261、467、803位点进行检测,并与普通PCR比较。结果实时PCR最佳错配引物为261nor-260(A→T)、261mut-260(C→T)、467mut-466(T→G)、803nor-804(T→G)、803mut-804(T→G),利用熔解曲线可对261、467、803位点进行分型,无明显干扰。SYBR Green I实时PCR快速准确,灵敏度最高可达12.5ng。结论普通PCR虽然操作简便,但受模板质量和反应条件的影响较大,利用SYBR Green I实时荧光PCR的融解曲线分析可以准确快速鉴定血型多态性位点的基因型。