【摘 要】
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目的 通过高压水枪法将双报告基因[即绿色荧光蛋白(GFP)和萤火虫荧光素酶(Luc)]导入小鼠肝脏,以熟练掌握高压水枪法,其将为后续相关研究奠定方法学基础.方法 将质粒pcEF.luc-IRES-GFP 瞬时转染入人肝癌细胞SMMC-7721 以进行载体体外功能验证,并利用高压水枪法将质粒pcEF.luc-IRES-GFP 经尾静脉注射入小鼠肝脏内,经小动物活体成像系统活体检测GFP 和Luc 信
【机 构】
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南方医科大学实验动物中心暨比较医学研究所,广东广州 510515;南方医科大学肿瘤研究所,广东广州 510515
【出 处】
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第十七届中南地区实验动物科技交流会
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目的 通过高压水枪法将双报告基因[即绿色荧光蛋白(GFP)和萤火虫荧光素酶(Luc)]导入小鼠肝脏,以熟练掌握高压水枪法,其将为后续相关研究奠定方法学基础.方法 将质粒pcEF.luc-IRES-GFP 瞬时转染入人肝癌细胞SMMC-7721 以进行载体体外功能验证,并利用高压水枪法将质粒pcEF.luc-IRES-GFP 经尾静脉注射入小鼠肝脏内,经小动物活体成像系统活体检测GFP 和Luc 信号,同时免疫组化检测GFP 在肝组织中的表达情况.结果 瞬转结果显示,7721 细胞上可检测到GFP 和Luc 表达；利用高压水枪法将pcEF.luc-IRES-GFP 导入小鼠肝脏后,利用小动物活体成像仪成功在肝内检测到GFP 和Luc 信号；免疫组化结果显示部分肝细胞表达GFP.结论 成功掌握了将目的基因导入小鼠肝脏的高压水枪法,这为相关后续研究打下良好基础.
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