【摘 要】
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目的：探讨锰对小鼠纹状体兴奋性氨基酸载体-1 (EAAC1)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的影响及两者对谷胱甘肽(GSH)合成的调控作用,为研究锰中毒致氧化损伤机制提
【机 构】
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中国医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室 辽宁沈阳110001
【出 处】
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中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会学术会议暨环境内分泌干扰物的毒理学研究新技术新方法研讨会
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目的：探讨锰对小鼠纹状体兴奋性氨基酸载体-1 (EAAC1)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的影响及两者对谷胱甘肽(GSH)合成的调控作用,为研究锰中毒致氧化损伤机制提供依据.方法：昆明小鼠72只,体重30±2g,雌雄各半.正式实验前喂养7天,然后按体重分组随机分成4组,每组18只.第1组为对照组；第2-4组分别为低、中、高、剂量染锰组.第1组腹腔注射0.9％氯化钠,第2-4组腹腔注射12.5、25和50mg/kg MnC12,每天染毒一次,持续2w.麻醉后处死小鼠,冰浴下分离脑纹状体.HE染色观察组织形态和电镜观察超微结构,制作单细胞悬液检查细胞内活性氧(ROS)水平,检测纹状体组织内丙二醛(MDA)、巯基、羰基和GSH含量及γ-GCS活力,免疫组化法检测EAAC1和γ-GCS的表达,Western blotting法检测EAAC1和γ-GCS蛋白水平.结果：与对照组比较,随着锰浓度的升高,纹状体组织形态和超微结构损伤逐渐加剧,小鼠纹状体内ROS、MDA及羰基含量逐渐升高,GSH和巯基含量显著下降；γ-GCS活力下降；γ-GCS免疫表达和蛋白水平逐渐降低,并呈现剂量依赖性关系.在50mg/kg MnCl2组损伤最为显著,可见纹状体神经元数量明显减少,细胞器超微结构受损,ROS平均荧光强度增至336.25±61.53,MDA和羰基含量明显增加至2.22±0.37和6.42±0.99 nmol/g pro,GSH和巯基含量降低至7.31±3.89和28.70±6.60 μmol/g/pro,γ-GCS活力下降至4.07±1.95 U/mg pro,γ-GCS免疫阳性表达和蛋白水平显著降低至48.08％和61.62％,而EAAC1的阳性面积比、积分光密度和蛋白水平呈现两极性变化. 结论：锰可导致小鼠纹状体EAAC1和γ-GCS表达发生改变进而抑制GSH合成并产生一系列氧化损伤.
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