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目的:构建体外NANOGP8重组蛋白原核表达载体pGEX-4T-1-NANOGP8,优化pGEX-4T-1-NANOGP8重组载体原核诱导表达条件并获得不同形式纯化的GST融合蛋白,初步筛选THP-1细胞中与NANOGP8相互作用的蛋白质.方法:1.从plvx-NANOGP8重组质粒扩增出NANOGP8基因,将其与原核表达载体pGEX-4T-1双酶切后,回收目的片段,通过T4连接酶定向连接该基因和pGEX-4T-1,获得重组蛋白NANOGP8原核表达质粒pGEX-4T-1-NANOGP8;用该质粒转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3),IPTG诱导该蛋白表达,经Western blot鉴定获得的蛋白.2.对诱导条件进行优化,并获得可溶性及包涵体形式的GST融合蛋白,使用Glutathione Sepharose 4B Beads对不同形式的CST融合蛋白进行纯化,Western blot鉴定获得的纯化蛋白.3.GST融合蛋白沉降试验(GST-pull down)下拉THP-1细胞中与NANOGP8相作用的蛋白质,嗜银染色和质谱初步筛选出与NANOGP8作用的相关蛋白.