【摘 要】
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目的：评价一种双膦酸盐-肝素复合物(BIP)对体外破骨细胞形成分化的抑制作用.方法：1.体外破骨细胞的诱导分化：选用成年C57/BL6小鼠股骨骨髓细胞,在有单核巨噬细胞集落刺激因
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目的：评价一种双膦酸盐-肝素复合物(BIP)对体外破骨细胞形成分化的抑制作用.方法：1.体外破骨细胞的诱导分化：选用成年C57/BL6小鼠股骨骨髓细胞,在有单核巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)存在环境下离体培养4天,得到破骨细胞的前体细胞——骨髓单核巨噬细胞(BMM),然后同时加入M-CSF和NFKB配体受体激动剂(RANKL)培养5天,得到成熟分化的破骨细胞(OC).2.评价BIP对BMM的毒性试验：在96孔板中用含不同浓度BIP(0,5,10,20,40,80,160,320 ug/ml)的培养基培养BMM2-4天,再用CCK-8试剂盒测定细胞数量以了解该药物对细胞增殖的抑制效果.3.评价BIP对体外破骨细胞形成分化的抑制作用：在96孔板中用含不同浓度BIP(0,2.5,10,40 ug/ml)和M-CSF、RANKL的培养基培养BMM5天后,对细胞进行抗酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)染色,观察破骨细胞形成分化的情况,计算每孔破骨细胞的数量和面积.
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