枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)因其抗逆性强、耐高温高压、易贮存等优良特性,且具有调节肠道菌群平衡、增强动物免疫力、提高生产性能等诸多功能,被认为是理想的微生物添加剂。但随着研究的深入,人们发现其产品在应用方面存在活菌制剂稳定性差、产品种类单一、应用范围有限、效果不稳定等问题。许多研究表明,低聚糖和多糖提取物为有益微生物提供营养物质,且与益生素间有加和效应,将其与有益微生物结合使用可更好地维护动物消化道微生态的平衡,提高动物生产性能,提高动物免疫力,改善畜产品品质。前期研究虽取得了一定的应用效果,但多数试验仅将枯草芽孢杆菌与益生元简单相加,并且糖的剂量单一,可能并没有最大化地发挥枯草芽孢杆菌合生元的潜力。本试验正是在此基础上将不同水平的白术多糖、黄芪多糖、菊糖和果寡糖分别添加到枯草芽孢杆菌培养基中进行体外发酵培养,筛选每一种糖的适宜添加量并进行增殖效果的比较,为寻找更优的枯草芽孢杆菌合生元产品提供基础。试验分别在LB基础培养基中添加0,0.4,0.8,1.6,2.4,3.6,4.8,6.4,8,10 mg/mL共10个水平的白术多糖、黄芪多糖、菊糖和果寡糖,灭菌后按4%的接种量接种活化12 h的枯草芽孢杆菌种子液,在37℃,170r/min的培养箱中培养,分别在第3.5,4.5,5.5,6.5,7.5h测菌液的OD值。根据这五个时间段的OD值及生长趋势线筛选出白术多糖、黄芪多糖、菊糖和果寡糖的适宜添加量。然后将筛选出的这四种糖在适宜浓度下的增殖效果分别进行比较。结果表明:不同水平的白术多糖、黄芪多糖、菊糖和果寡糖对枯草芽孢杆菌的生长影响不同。(1)0.0~1.6 mg/mL的白术多糖促进枯草芽孢杆菌的生长,且0.8 mg/mL白术多糖增殖效果最好;白术多糖的浓度大于2.4 mg/mL时开始抑制枯草芽孢杆菌的生长,大于4.8 mg/mL时明显抑制枯草芽孢杆菌的生长;(2)0.4 mg/mL黄芪多糖对枯草芽孢杆菌有促进作用,0.8 mg/mL时开始抑制枯草芽孢杆菌的生长,且随着多糖的浓度增大其抑制作用越明显;(3)0.0~1.6 mg/mL的菊糖几乎均能促进枯草芽孢杆菌的生长,且0.4 mg/mL菊糖增菌效果最好,浓度大于2.4 mg/mL时抑制枯草芽孢杆菌的生长,但抑制程度小于白术多糖;(4)随着果寡糖的水平提高,OD值先增大,到2.4 mg/mL时增殖效果最好,之后随着其浓度的增大增殖效果有所降低,但10.0mg/mL时,枯草芽孢杆菌仍没有出现被抑制现象。上述结果表明,不同类型的糖,其促进枯草芽孢杆菌生长的有效浓度有所不同,白术多糖、黄芪多糖、菊糖和果寡糖的最佳添加量分别为0.8 mg/mL、0.4 mg/mL、0.4 mg/mL、2.4 mg/mL,且0.8 mg/mL白术多糖对枯草芽孢杆菌的增殖效果最好。