花生油体蛋白基因的克隆及表达分析

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油体蛋白是一类镶嵌在油体表面的碱性小分子蛋白,可维持油体的稳定性,并能够参与植物抵御逆境胁迫。本研究从花生耐盐突变体S1转录组中筛选获得6个具有保守脯氨酸结构域的油体蛋白基因,分属于U、SL和SH三个亚家族。通过序列比对和系统发育分析,发现P亚家族由绿藻进化而来并存在于低等绿藻、苔藓和蕨类植物中;U亚家族在进化过程中更为保守;而SL和SH两个亚家族在进化过程中都出现了保守性较高的新的motif;T亚家族由SL亚家族进化而来,仅在十字花科的植物中存在。荧光定量PCR检测结果表明这6个油体蛋白基因在花生不同组织器官中的表达存在明显差异,在叶子和花器中有低量表达,在根中的表达量最低,而在种子中的表达量最高,且随着种子发育其表达量不断增加。这6个油体蛋白基因在受到NaCl、PEG、ABA和低温处理下表达量增加,但表达趋势存在明显差别,表明这些基因在花生抗逆胁迫过程中所发挥的功能有差异。利用转录组测序进一步分析表明其中4个油体蛋白基因在耐盐突变体和诱变亲本中的表达量存在显著差异,在NaCl胁迫处理24 h后,耐盐突变体中它们的表达量分别为诱变亲本的107、55、18、4倍。据此推测这4个油体蛋白基因可能与花生耐盐突变体的耐盐性有关。另外,发现油体蛋白基因启动子均含有ABRE、HSE等胁迫相关调控元件,以及Skn-1和ACGT等种子特异表达元件,个别启动子还存在Prolamin框、GCN4、RY和AACA等种子特异表达相关基序。
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