【摘 要】
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[目的]比较鼻咽癌细胞(CNE-2)和鼻咽癌放射抗拒细胞(CNE-2R)分泌蛋白的差异。[方法]利用克隆形成实验验证CNE-2和CNE-2R细胞的放射敏感性差异;iTRAQ技术联合LC-ESI-MS/MS技术
【机 构】
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广西医科大学附属肿瘤医院; 广西肿瘤防治研究所实验研究部;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81360343);广西重点实验室专项经费自主研究项目(GK2013-13-A-02-01);广西医疗卫生重点科研项目(重2011076)
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[目的]比较鼻咽癌细胞(CNE-2)和鼻咽癌放射抗拒细胞(CNE-2R)分泌蛋白的差异。[方法]利用克隆形成实验验证CNE-2和CNE-2R细胞的放射敏感性差异;iTRAQ技术联合LC-ESI-MS/MS技术鉴定CNE-2和CNE-2R细胞差异分泌蛋白,并利用SignalP 3.0,Secretome 2.0软件和ExoCarta exosome database数据库初步鉴定差异分泌蛋白;Western Blot实验验证再次鉴定差异分泌蛋白;免疫细胞化学验证CD 1 66分子在鼻咽癌细胞中的表达。[结果]CNE-2R细胞比CNE-2细胞更具有放射抗拒;CNE-2和CNE-2R细胞的分泌蛋白不同,筛选出26个差异蛋白;Western Blot结果示CNE-2细胞的Fibrillin-2(P=0.017)和Sulfhydryl oxidase 1(P=0.000)蛋白表达高于CNE-2R细胞,CNE-2细胞的CD166(P=0.012)和Cofilin-2(P=0.003)蛋白表达低于CNE-2R细胞,这四个蛋白可能与细胞的转移,迁徙和侵袭有关;免疫细胞化学结果示CD166在少量鼻咽癌细胞(CNE-2、CNE-2R)中表达。[结论]本实验筛选出26个可能与放射抗拒相关的差异蛋白,其中包括可能作为鼻咽癌肿瘤干细胞标记的CD166分子。
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