【摘 要】
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目的 探讨丙烯醛对其毒性作用及其可能机制,为丙烯醛对阿尔兹海默症(AD)的发病机制研究提供依据.方法 通过细胞急性毒性实验(CCK-8毒性实验和集落形成实验)测得LC50；运用Spectra Max M3型酶标仪对不同浓度丙烯醛处理后的细胞内总GSH含量和胱天蛋白酶3酶活性进行测定,并通过Western blot检测胱天蛋白酶3蛋白质在不同浓度丙烯醛处理PC12细胞后的表达情况,从而了解细胞内氧化
【机 构】
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杭州师范大学医学院预防医学系,浙江杭州310036
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目的 探讨丙烯醛对其毒性作用及其可能机制,为丙烯醛对阿尔兹海默症(AD)的发病机制研究提供依据.方法 通过细胞急性毒性实验(CCK-8毒性实验和集落形成实验)测得LC50；运用Spectra Max M3型酶标仪对不同浓度丙烯醛处理后的细胞内总GSH含量和胱天蛋白酶3酶活性进行测定,并通过Western blot检测胱天蛋白酶3蛋白质在不同浓度丙烯醛处理PC12细胞后的表达情况,从而了解细胞内氧化还原状态和细胞死亡机制；同时通过测序初步筛查丙烯醛诱导PC12细胞的miRNAs差异表达.结果 丙烯醛经CCK-8急性毒性实验测定其LC50=29.9065 μmol·L-1,集落形成实验测定LC50 =21.6159μmol·L-1；不同浓度丙烯醛处理PC12细胞24 h后可引起细胞内总GSH的下降,且浓度越大,细胞内总GSH含量下降更明显；不同浓度丙烯醛处理24 h后细胞内胱天蛋白酶3酶活性未见明显上调,但处理较短时间(2,4和8h)可见上调倾向；用胱天蛋白酶3作为一抗对不同浓度丙烯醛处理24后进行Western blot实验可见胱天蛋白酶3蛋白表达,其中丙烯醛浓度越高,蛋白表达越低；较低剂量(16和32 μmol·L-1)丙烯醛处理PC12细胞24 h后可诱导部分miRNA的差异表达.结论 丙烯醛对PC12细胞产生较强的细胞毒性,其可能机制为通过细胞内GSH的耗竭和DNA氧化性损伤,造成氧化应激；不同浓度丙烯醛处理PC12细胞可诱导细胞凋亡.
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