【摘 要】
：
目的：建立内毒素刺激下人肺微血管内皮细胞(HPMEC)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-型受体(ATR1)与其配体AngⅡ结合的放射受体分析法(RRA)。 方法：体外培养的HPMEC接种于24孔板，当细胞达
【机 构】
：
东南大学附属中大医院危重医学科东南大学急诊与危重病研究所(210009)
论文部分内容阅读
目的：建立内毒素刺激下人肺微血管内皮细胞(HPMEC)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)-型受体(ATR1)与其配体AngⅡ结合的放射受体分析法(RRA)。
方法：体外培养的HPMEC接种于24孔板，当细胞达到80～90％融合度后，饥饿24h用浓度为100ng/ml的LPS刺激8小时，用0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、2.Ofmol八个不同剂量的放射性配体125I—Angu(TL表示其放射性)在板孔中与ATRl结合(存在或不存在5μgAngⅡ)，然后γ计数仪计数，测定ATR1的总结合(TB)与非特异性结合(NSB)，TL减去TB得游离放射配体(F)，TB减去NSB得ATR1的特异性结合(B)。由TB与TL作图得ATR1饱和曲线；由B/F与B作图制作Scatchart曲线。
结果:随放射性配体125I—AngⅡ加入量的增加，NSB也相应逐渐增加，且由直线相关与回归分析得到NSB与加入125I-AngⅡ剂量呈直线关系(R1=0.9929)；Scatchan作图得B/F与B也呈直线关系，其相关系数R2=0.9514，HPMEC上仅存在单一亲和力的AngⅡ受体，反应亲和力的Kd值为109pmol/5×105细胞，从Scatchart曲线与X轴截距得到ATR1的最大结合位点Bmax为29pmol/5×105细胞：ATR1饱和曲线分为两段，前段斜率较大随125I-AngⅡ加入量的增加TB增加明显；后端曲线较为平坦TB随125I—AngⅡ的增加变化不明显，125I-AngⅡ在1600pmol/5×105细胞到2000pmol/5×105细胞之间TB的增加与NBS增加基本相当，能使ATR1饱和的125I-AngⅡ剂量为1600pmol/5×105细胞。
结论：建立的RRA方法能得到ATR1的Kd与Bmax两个基本参数，可用于LPS刺激下HPMEC的ATR1功能研究。
其他文献
目的：观察雾化吸入全氟化碳(perfluorocarbon，PFC)及盐酸氨溴素(沐舒坦)对急性肺损伤兔肺组织病理改变，气体交换、TNF-α mRNA及抗氧化方面的影响。方法：用油酸制备兔急性肺损伤(
过去山区冷清清,只有风吹落叶声。自从安上广播后,有说有唱喜煞人。国家大事它报告,县委指示听得清。
In the past, the mountains were deserted and there was only wind
我们在去年11月应缅甸文化部的邀请,到缅甸首都仰光去帮助文化部剧团的演员排演中国舞蹈和教中国舞基本训练。我们工作组一共有七位同志,我们两人是负责教舞蹈的。今年6月工
目的：观察雾化吸入全氟化碳(perfluorocarbon，PFC)对急性肺损伤兔肺组织病理改变，TNF-α mRNA及气体交换的影响。方法：用油酸制备兔急性肺损伤(ALI)模型后，将动物随机分为两组：常规
8 活性染料用于天然纤维和尼龙纤维染色rn8.1 羊毛活性染色rn8.1.1 历史rn1938年,德国IG公司推出了最早的含氯乙酰氨活性基团毛用染料Supramino橙R.1954年,Ciba公司推出了含
本文重点研究对多种原因所致呼吸衰竭患者进行机械通气时，不同PEEP水平对左右心功能的影响。研究表明，机械通气在相对容量恒定时，在0～13cmH2O的PEEP对正常心脏无明显影响，对衰竭心
目的：探讨二硫代氨基吡咯烷(PDTC)对急性肺损伤(ALI)肺组织核转录因子(NF—κB)和细胞间粘附分子(ICAM—1)表达的影响及对肺损伤的保护作用。方法：经尾静脉注射油酸建立ALI模型
目的：探讨强化手卫生，包括改进医护人员洗手条件，加强洗手教育，提高洗手依从性等措施，对ICU内耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染控制的效果。方法：监测分析强化手卫生前后ICU内痰标本耐
有一个古老的传说:被老虎吃掉的人,魂不敢到别处去,一直跟着老虎,为老虎服务,叫作伥鬼。老虎出去觅食,伥鬼必定在前面引路,如果路上有陷阱,伥鬼就领老虎绕道而行伥鬼称老虎
目的：寻找呼气末二氧化碳分压(PetCO2)及其衍生指标与肺泡通气状态以及肺血流的关系，寻找临床可行的指导呼气末正压(PEEP)使用的方法。 方法：5只健康杂种犬建立油酸ARDS模型