【摘 要】
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目的:本研究旨在探究加热灭活是否会影响双歧杆菌在体外活化巨噬细胞产生细胞因子的能力。方法:一株来源于婴儿肠道的双歧杆菌Bifidobacterium bifidum TMC3115作为受试菌,在TOS培养基上厌氧培养48h后,调整菌浓度为108CFU/ml,65℃30分钟进行热灭活处理,按照灭活组,未灭活组,阳性对照组（LPS组）,空白对照组（细胞培养基RPMI 1640）进行分组,各自100μl
【机 构】
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第十三届中国西部营养与健康高峰论坛论文集
【出 处】
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第十三届中国西部营养与健康高峰论坛论文集
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目的:本研究旨在探究加热灭活是否会影响双歧杆菌在体外活化巨噬细胞产生细胞因子的能力。方法:一株来源于婴儿肠道的双歧杆菌Bifidobacterium bifidum TMC3115作为受试菌,在TOS培养基上厌氧培养48h后,调整菌浓度为108CFU/ml,65℃30分钟进行热灭活处理,按照灭活组,未灭活组,阳性对照组（LPS组）,空白对照组（细胞培养基RPMI 1640）进行分组,各自100μl样品与细胞浓度为5×105的小鼠巨噬细胞J774A.1共培养24h,收集细胞上清液采用ELISA试剂盒测定上清液中细胞因子（IL-6,IL-10、TNF-α）的含量,同时提取细胞RNA,RT-qPCR法测定各细胞因子基因表达水平,单因素方差分析比较灭活组与未灭活组及阳性、阴性对照组细胞因子分泌水平的差异。结果:与空白对照组相比,无论是灭活组还是未灭活组,细胞因子IL-6,IL-10、TNF-α在基因水平和分泌蛋白水平都显著升高（p＜0.01）;未灭活组IL-10在基因水平与LPS组无显著差异,但在蛋白分泌水平显著高于LPS组（p＜0.01）,灭活组IL-10分泌量在基因水平和分泌蛋白水平都显著高于LPS组,两组中细胞因子IL-6和TNF-α分泌量都显著低于LPS组（p＜0.01）;与未灭活组相比,灭活组IL-10无论在基因水平还是分泌蛋白水平分泌量都显著升高（p＜0.01）,细胞因子IL-6和TNF-α分泌量在两组间未发现明显差异。结论:受试双歧杆菌能刺激小鼠巨噬细胞分泌细胞因子,加热灭活不显著影响受试双歧杆菌诱导巨噬细胞分泌促炎因子,却能促进其诱导巨噬细胞分泌抗炎因子,说明灭活双歧杆菌灭活不会降低双歧杆菌的免疫功能反而可能增加其抗炎作用。
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