【摘 要】
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目的:探讨磁性纳米颗粒Fe3O4磁场热疗联合尼妥珠单抗(hR3)干预人食管癌细胞株的影响.方法:Western blot检测人食管癌高分化细胞株TE-1、低分化细胞株Eca109的EGFR表达状况,普鲁士蓝染色法观察磁性纳米颗粒Fe3O4对细胞形貌影响,MTT和CellTiter-Glo分别检测Fe3O4、hR3、二者联合对TE-1、Eca109活力影响,磁感应热疗作用后TE-1、Eca109光镜
【机 构】
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210009 东南大学附属中大医院肿瘤科 210009 东南大学生物科学与医学工程学院
【出 处】
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第十四届全国临床肿瘤学大会暨2011年CSCO学术年会
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目的:探讨磁性纳米颗粒Fe3O4磁场热疗联合尼妥珠单抗(hR3)干预人食管癌细胞株的影响.方法:Western blot检测人食管癌高分化细胞株TE-1、低分化细胞株Eca109的EGFR表达状况,普鲁士蓝染色法观察磁性纳米颗粒Fe3O4对细胞形貌影响,MTT和CellTiter-Glo分别检测Fe3O4、hR3、二者联合对TE-1、Eca109活力影响,磁感应热疗作用后TE-1、Eca109光镜下形态变化,磁感应热疗、hR3、二者联合hR3作用TE-1、Eca109后荧光显微镜观察凋亡及流式细胞术检测凋亡,RT-PCR、western blot分别检测各种处理后bax、bcl-2、PCNA、HSP70mRNA/蛋白水平.结果:细胞株TE-1呈EGFR低表达(EGFR/β-actin=0.12),Eca109呈EGFR高表达(EGFR/β-actin=0.52); Fe3O4与细胞共同孵育,光镜下细胞形态未变化,胞内明显存在Fe3O4,随Fe3O4浓度增加,胞内Fe3O4显著增加;0-2mg/ml浓度范围Fe3O4单独及与联合hR3培养24h后,MTT显示,随粒子浓度升高细胞活力显著升高,而CellTiter-Glo则显示,随粒子浓度升高细胞活力显著降低,提示两种实验结果均存在由Fe3O4所致明显系统误差;不同浓度磁感应热疗后,光学显微镜观察发现TE-1、Eca109细胞变形、皱缩,且随粒子浓度增加细胞形态变化增加;DAPI染色提示不同处理因素作用于TE-1、Eca109细胞,随着粒子浓度增加,细胞凋亡率明显增加,Fe3O4联合hR3组较单一Fe3O4以及单一hR3组有增加;不同处理因素作用于细胞后,流式细胞仪检测凋亡显示Eca109/TE-1对照组、hR3组、磁感应热疗组、hR3+磁感应热疗组凋亡率分别是2.2±0.36/4.9±0.28、3.6±0.29/5.3±0.14、3.6±0.29/5.3±0.14、2.5±0.32/6.2±0.22,差异具有统计学意义(P＜0.5);RT-PCR、western blot提示不同处理因素处理后bax mRNA、蛋白水平升高,bcl-2、PCNA、HSP70 mRNA、蛋白水平均降低,差异具有统计学意义(P＜0.5).
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