【摘 要】
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目的：应用Cre-Loxp系统构建Claudin-7蛋白在肠道可诱导性条件性基因敲除小鼠模型，并进行表型分析。方法：构建Claudin-7打靶载体，通过电击法转染入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)，用正
【机 构】
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首都医科大学附属北京世纪坛医院肿瘤中心,北京100038
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目的：应用Cre-Loxp系统构建Claudin-7蛋白在肠道可诱导性条件性基因敲除小鼠模型，并进行表型分析。方法：构建Claudin-7打靶载体，通过电击法转染入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)，用正负筛选法筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定和Southern鉴定，利用显微注射把发生正确同源重组的ES细胞注射进C57BL/6N小鼠囊胚，移入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠。将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠交配获得Claudin-7-flox小鼠，该小鼠与Pvillin-CreERT2转基因小鼠杂交，通过子代自交获得Claudin-7在肠道可诱导性条件性基因敲除(Cldn7fl/fl Villin-CreERT2)的小鼠，他莫昔芬(tamoxifen)药物诱导肠道Claudin-7基因敲除，对小鼠进行表型分析。
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