【摘 要】
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为建立快速、敏感、特异的可用于现场鸡传染性喉气管炎(ILT)检测和诊断的方法,我们选择了鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)TK基因作为PCR扩增的目的基因,因为疱疹病毒的TK基因是高
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为建立快速、敏感、特异的可用于现场鸡传染性喉气管炎(ILT)检测和诊断的方法,我们选择了鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)TK基因作为PCR扩增的目的基因,因为疱疹病毒的TK基因是高度保守的,ILTV不同毒株之间更加保守。根据已发表序列设计一对包含ITLV TK基因全长核苷酸的1259bp引物,分别为5’—ATGACTACAATTTTGCCC—3’和5’—GGAACATTACGAACCCAT—3’,以2株ILTV强毒和1株ILTV疫苗毒提取的DNA为模板进行PCR扩增,均能扩增出预期大小的目的片段,EcoRI酶切后可得到566bp和693bp两条带,证实了目的片段的特异性,而对其它禽病原体的扩增均为阴性。将ILTV疫苗毒DNA10倍稀释为模板,PCR扩增ILTV DNA的最小检测量为75pg。以ILTV强毒株和疫苗株经滴鼻途径感染SPF鸡,5天扑杀取气管棉拭样品,提取核酸,PCR扩增ILTV TK基因,均能得到阳性条带。因此所建立的方法可用于临诊样品鸡传染性喉气管炎病的检测和诊断。
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