【摘 要】
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目的:制备针对新城疫病毒F48E9株单克隆抗体，以用于NDV抗原变异研究及检测方法建立。方法:用新城疫病毒F48E9株全病毒及原核表达的重组F48E9-NP蛋白免疫BALB/c小鼠，全病毒间接ELISA筛选杂交瘤细胞株。用免疫印迹和间接免疫荧光试验鉴定单抗反应原性，间接ELISA试验鉴定单抗与其他NDV毒株的交叉反应，并采用NP蛋白分段融合表达技术对单抗识别区域初步定位。结果:共筛选到3株单抗杂交
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,哈尔滨 150001 东北农业大学生命科学学院,哈尔滨 150030
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会
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目的:制备针对新城疫病毒F48E9株单克隆抗体，以用于NDV抗原变异研究及检测方法建立。
方法:用新城疫病毒F48E9株全病毒及原核表达的重组F48E9-NP蛋白免疫BALB/c小鼠，全病毒间接ELISA筛选杂交瘤细胞株。用免疫印迹和间接免疫荧光试验鉴定单抗反应原性，间接ELISA试验鉴定单抗与其他NDV毒株的交叉反应，并采用NP蛋白分段融合表达技术对单抗识别区域初步定位。
结果:共筛选到3株单抗杂交瘤细胞株3E7、2D11和4812，免疫印迹和间接免疫荧光试验分析表明，3株单抗均针对病毒NP蛋白的线性表位；单抗3E7、4812与基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅸ、Ⅶ型共11株NDV均有反应性，单抗2D11仅与基因Ⅶ型中QY97、Mallard/CH/HLJ001/06和基因Ⅲ型中Mutkaswar株反应。单抗2D11识别NP基因开放阅读框C端的1303-1413处(37个aa)；单抗3E7、4812识别NP基因ORFC端的1372-1470处(共33个aa)。
结论:获得了针对NDV F48E9株NP蛋白的3株识别线性表位单抗，将在NDV抗原变异研究及检测方法建立方面进行应用。
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