【摘 要】
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电转染法获得转基因动物细胞是转基因克隆动物研究的重要技术环节。本研究探讨了利用电转染法制备水牛转基因体细胞作为供体,生产转基因克隆胚胎的可行性。采用组织块贴
【机 构】
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广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁530005
【出 处】
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中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会
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电转染法获得转基因动物细胞是转基因克隆动物研究的重要技术环节。本研究探讨了利用电转染法制备水牛转基因体细胞作为供体,生产转基因克隆胚胎的可行性。采用组织块贴壁法分离培养得到水牛胎儿成纤维细胞,经核型分析表明得到的细胞具有正常的生物学特性,可用于细胞转染。然后,对电击参数进行了优化,结果发现电压为300 V,脉冲时间为10 ms时,细胞存活率约为50％,电击效果较好。而后,探讨了载体元件IRES序列对转基因筛选效率的影响,结果显示：电转含IRES载体的细胞可在G418筛选两周后就形成独立性较好的克隆,转染不含IRES载体的细胞在筛选三周后方能形成克隆。
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