【摘 要】
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目的：为对四川省某猪场腹泻病病原进行分离鉴定,并进一步研究其分子生物学特性。方法：本试验对四川省某猪场疑似感染PEDV的腹泻猪粪便样品进行采集;参照NCBI上登录的CV777株M基因全基因序列设计引物,用RT-PCR法初步鉴定样品阴阳性,同时克隆测定M基因序列。结果：分析结果表明该株PEDV与NCBI上10个毒株推导氨基酸序列同源性均高于95％;遗传进化树分析结果显示该毒株与GDYE9遗传距离最近
【机 构】
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四川农业大学动物医学院,四川雅安625014;生命科学与技术学院西南民族大学,四川成都610041
【出 处】
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四川省畜牧兽医学会2014学术年会
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目的：为对四川省某猪场腹泻病病原进行分离鉴定,并进一步研究其分子生物学特性。
方法：本试验对四川省某猪场疑似感染PEDV的腹泻猪粪便样品进行采集;参照NCBI上登录的CV777株M基因全基因序列设计引物,用RT-PCR法初步鉴定样品阴阳性,同时克隆测定M基因序列。
结果：分析结果表明该株PEDV与NCBI上10个毒株推导氨基酸序列同源性均高于95％;遗传进化树分析结果显示该毒株与GDYE9遗传距离最近;用Vero细胞对病毒进行连续带毒传代,观察细胞病变,同时应用电镜技术对病毒形态进行观察;通过TCID50测定,中和试验以及核酸类型的鉴定,综合判定病毒分离成功;用分离的毒株进行乳猪回归试验,结果表明三只试验猪均出现腹泻症状.
结论：试验结果均表明PEDV DY株被成功分离.
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