【摘 要】
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目的:探究Wnt5a在黑素细胞增殖和黑素合成过程中的作用并且阐明其中涉及到的分子机制.方法:利用MTT和BRDU法检测Wnt5a处理过的melan-a细胞的增殖情况.利用NaOH和DOPA两种方法检测Wnt5a对黑素细胞产黑色的作用;并通过RT-PCR和Western-Blot法从基因水平上进行探究;并在在体的研究中进一步探究结论.利用RT-PCR从RNA水平上检测Wnt5a信号通路中关键分子的增
【机 构】
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解放军第三军医大学学员旅五队,重庆市400038 解放军第三军医大学基础部细胞生物教研室,重庆市4
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目的:探究Wnt5a在黑素细胞增殖和黑素合成过程中的作用并且阐明其中涉及到的分子机制.
方法:利用MTT和BRDU法检测Wnt5a处理过的melan-a细胞的增殖情况.利用NaOH和DOPA两种方法检测Wnt5a对黑素细胞产黑色的作用;并通过RT-PCR和Western-Blot法从基因水平上进行探究;并在在体的研究中进一步探究结论.利用RT-PCR从RNA水平上检测Wnt5a信号通路中关键分子的增减情况,从而确定哪条途径起到了作用,并讨论Wnt5a与经典信号途径的关系.
结果:MTT和BRDU结果显示Wnt5a显著抑制melan-a细胞的增殖.黑色素和酪氨酸酶活性的检测以及基因表达和在体实验提示Wnt5a在黑素合成过程中发挥抑制作用.此外,RT-PCR和Western blot结果显示Wnt5a对melan-a细胞的抑制作用是通过激活非经典的Wnt/Ror2信号通路并且抑制经典Wnt信号通路实现的.
结论:Wnt5a通过激活非经典Wnt/Ror2信号通路和抑制经典Wnt信号通路来抑制黑色素细胞的增殖和黑色素合成.
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